Gq 蛋白偶联受体激活过程通常借助于具有 荧光功能的微孔板读板机来实时监测钙敏 感的荧光染料与细胞内钙离子的结合来实 现。通常我们会通过微孔板读板机内的自 动移液装置将激动剂化合物加到预铺细胞 的孔板中,然后读板机检测系统实时监测 化合物引起的荧光强度值的变化,对动力 学检测结果进行分析,可以得到关于化合 物响应曲线的一些信息,其中包括激动剂 和拮抗剂的 EC50 和 IC50 值。 在本篇应用文献中,我们介绍了如何利用 配有注射器模块的 SpectraMax i3x 多功 能微孔板读板机来对两种不同的细胞系进 行钙离子浓度测定。 CHO M 1 WT 3 是采用中国仓鼠卵巢细胞 稳定转染 M 1 毒蕈碱的 Gq 受体细胞,1321 N 1 是人星形细胞瘤细胞系具有内源性毒蕈 碱胆碱能受体,借助于 SoftMax Pro 软件 的数据分析功能精确获得两个细胞系的 EC50 和 IC50 值,我们与以前使用高通量筛 选系统获得的结果进行比较。在软件的 Acquisition Editor 界面下,流程化界面 方便我们设置注入器的相应参数