Molecular Devices 的 IMAP 技术能对激 酶，磷酸酶和磷酸二酯酶进行快速，均质 和非放射性的分析，非常适用于分析开发 和高通量筛选。IMAP 检测是基于磷酸基 团与固定在纳米微粒表面的三价金属阳离 子之间的高亲和力结合。可以使用 FP 与 TR - FRET 两种读数方法来检测磷酸化底 物与纳米微粒相互的结合情况。在 FP 方法 中，当 IMAP 结合溶液与磷酸化底物结合 时，肽的分子运动被改变，引起标记在肽 上的荧光分子的荧光偏振效应 (FP) 增加 ( 图 1，左 )。在 TR - FRET 方法中，当存在 磷酸化的荧光底物时，铽 (Tb) 供体能够与 底物荧光受体发生荧光能量转移 ( 图 1， 右 )。该方法使用时间分辨荧光 (TRF) 检测 模式，能够消除了测定组分或筛选中化合 物的荧光干扰，并且底物尺寸和浓度的选 择更灵活。 环核苷酸磷酸二酯酶 (PDEs) 是一组可降解 cAMP 和 cGMP 的磷酸二酯键的酶，是参 与各种生物过程的第二信使。 由于它们在 心脏病，痴呆症，抑郁症等领域具有很现 实的临床意义，已成为一类药物治疗的靶 标分子。 在本应用文章中，我们使用 IMAP 技术进行 PDE 酶稀释实验和生成抑制曲线，实验能在 Spectr SpectraMax Paradigm，SpectraMax M 5 和 FlexStation 3 多功能 读板机上完成，结合 SoftMax Pro 软件进 行获取和分析数据。
