蛋白激酶在调节许多细胞反应过程时起着核 心的作用。近年来已经成为癌症和其它许多 疾病药物重要的作用靶点。IMAP是Molecular Devices 公司推出一种快速、非放射性的 激酶检测技术，由于技术本身特点其非常适 合 用 于 进 行 试 验 优 化 和 高 通 量 的 筛 选 。 IMAP检测技术基于的原理是磷酸根离子与 表面固化有三价金属离子的纳米球颗粒的一 种结合作用。当这种结合反应发生后，荧光 标记的多肽分子的运动轨迹发生了改变，荧 光标记复合物的荧光偏振值就会增加 (SeeFigure 1.)。因为是一种均相的，可忽 视底物多肽序列的一种检测方法，所以可广 泛的应用于多种激酶的检测。 当使用 IMAP技术进行试验优化和高通量的 筛选时，SpectraMax M5多功能微孔板读板 机可作为其非常理想的、可靠的检测平台。 SpectraMax M5是一种基于光栅型单色器 的多功能微孔板读板机，允许使用者针对不 同的荧光染料分子随意选择不同的检测波 长，而无需额外再选购滤光片配件。这篇应 用文章详细的描述了在进行IMAP荧光偏振 激酶试验时，如何使用SpectraMax M5 多 功能微孔板读板机和 SoftMax Pro 软件进 行检测和分别对红色及绿色荧光底物来校正 曲线。LCK是一种酪氨酸酶，在T细胞信号转导通路中发挥着非常关键作用，制备其稀释曲线。另外Akt1/PKBa，一种丝氨酸苏氨酸激酶，参与磷脂酰肌醇激酶3的信号转导和细胞活力。通过十字孢碱抑制Akt1/PKBa的试验中，计算FAM和TAMRA分别标记的多肽底物在反应过程始中获得的Z'因子值，其结果与滤光片式多功能微孔板读板机上获得的结果相一致。
