报告基因是研究细胞通路激活相关基因表 达的重要工具。细胞转染含有报告基因和 感兴趣基因序列的质粒,通常是启动子或 其他转录控制元件。当启动子激活时,报 告基因表达且可测定其表达水平。 萤火虫荧光素酶是普遍使用的报告基因。 其发光信号所提供的灵敏度相比荧光和其 他方法更胜一筹。第二种发光报告基因是 海肾荧光素酶,通常作为组成型启动子的 对照,用以标准化诸如转染效率和细胞数 量等差异。由于萤火虫荧光素酶和海肾荧 光素酶使用不同的底物,所以两者可在同 一个孔中使用双荧光素酶实验进行检测。 SpectraMax DuoLuc Reporter Assay 试 剂盒可实现在微孔板中使用萤火虫和海肾 荧光素酶进行高灵敏度定量实验。添加萤 火虫工作液到样品孔可启动萤火虫发光反 应,然后在加入海肾工作液可淬灭萤火虫 荧光素酶反应同时启动海肾荧光素酶发光 反应。 FlexStation 3 多功能微孔读板机可在 96 或 384 孔板中进行高灵敏和高通量的 SpectraMax DuoLuc 实验检测。在 FlexStation 3 读板机中,整个反应系列都 是实时监测的,并同时进行机载试剂的吸 液加液和发光检测