活性氧 (Reactive oxygen species,ROS) 是 一类由细胞有氧代谢产生的具有化学反应 活性的一类含氧分子,参与细胞信号转 导、免疫防御以及维持体内动态平衡等各 项生理活动。然而当细胞处于环境压力 时,胞内的 ROS 含量水平就会急剧上升造 成核酸、蛋白和脂类物质的氧化损伤[1], 从而引起许多生理、病理变化,诸如男性 不育、癌症的发生等等[2]。 胞内 ROS 含量水平通常采用荧光探针,尤 其绿色荧光探针来检测。然而由于绿色荧 光检测和成像易受细胞自发荧光的影响[3], 因此远/近红外染料常被用来检测 ROS 含 量从而避免细胞自发荧光的干扰。 SpectraMax iD5 多功能微孔读板机采用超 冷型 PMT 和“2X2”光栅光路设计,可有效 降低信号背景减少杂散光,为远红外荧光 检测提供更宽的动态范围和更高的灵敏 度。 这里我们展示的是如何利用 SpectraMax iD5 多功能微孔读板机和 2 个荧光检测试剂盒来 进行胞内 ROS 含量分析的。在 Spectral Optimization Wizard 帮助下,我们优化 了远红外分析检测下激发光和发射光的不 同波长组合,并最终比较了绿色荧光检测 和远红外荧光检测结果的表现