报告基因实验一般用来研究真核生物的基 因表达。在双报告基因实验中，细胞都转 染了两种质粒，一种含有的目的基因调控 的启动子，另一种包含一个质控基因的组 成型启动子。将目的报告基因与质控报告 基因共转染，最小程度减少实验误差。 生物发光报告系统广泛联合使用萤火虫和 海肾荧光素酶，因为它们都很容易操作且 极其灵敏。Promega公司的双报告基因 实验(DLR)系统允许使用者在一个微孔板 孔中分别检测萤火虫和海肾荧光素酶活 性，其中萤火虫作为实验报告，海肾作为 质控基因。Figure 1展示了两个酶促反 应，按顺序发生在相同的实验孔中。萤火 虫荧光素酶催化的荧光素的氧化会伴随着 光的释放。反应需要ATP, Mg2+ 和 O2。 海肾荧光素酶催化氧气依赖型腔肠动物荧 光素，但是不需要ATP或Mg2+。酶有着 不同的底物要求，所以它们可以在一个反 应体系中完成。 双报告基因实验需求两种不同的试剂含有 不同的底物，每次都需要进行化学发光读 数。这种实验流程可以轻松在 SpectraMax i3x多功能酶标仪的注射器卡 盒上进行，这套体系已通过DLReady体 系认证。我们在这篇应用文章中向大家展 示了重组萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶 的6个数量级的线性范围检测，同时进行 了每孔195到25000个被转染细胞的线性 检测
