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使用定量发光试验检测病毒诱导的细胞病变效应
发布时间:2022-10-31 14:23:41 作者:小编 所属分类: 细胞生物学

病毒感染哺乳动物细胞通常会降低细胞活力,并对细胞造成 明显的影响,如形状或大小的改变,或与邻近细胞融合。这些 变化被称为细胞病变效应 (CPE),可以通过光学显微镜或成像 系统对细胞病变效应进行评估,或者使用更多的定量检测手 段对其进行测定。 Promega 公司的 Viral ToxGlo 检 测 试 剂 盒可以检 测 活 细 胞 中存在的 ATP,并提供一种简单的发光检测方法来定量细胞 活力。由于病毒诱导的 CPE 会耗尽细胞中的 ATP,导致发光 信号的减少,因此可以定量检测宿主细胞中病毒诱导的 CPE。 使 用简单的混合 读取工作流程,即可轻松地在 SpectraMax iD5 多功能微孔板读板机上检测到试验结果,并使用 SoftMax Pro 软件进行分析 。 这里,我们展示了如何使用 Viral ToxGlo 检测试剂盒来测定 病毒感染的哺乳动物细胞中的病毒感染力和半数组织培养感 染剂量 (TCID50),以 及如何测量化合 物的抗病毒效力。本研 究采用了之前描述的两种病毒感染模型 : 甲型 H1N1 流感病 毒 1 感 染 Madin-Darby 犬 肾 (MDCK) 细 胞, 人 冠 状 病 毒 株 229E(HCoV-229E)2 感染 MRC-5 人肺成纤维细胞。将两种具 有抗病毒作用的化合物利巴韦林 3 和瑞德西韦 4 应用于暴露于 病毒的细胞,并测定其抗病毒效力。

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