报告基因对于基因表达的研究来说是非常 有用的工具，它可以代替要研究的目的基 因，从而帮助我们了解目的基因的信号通 路和相关的疾病。荧光素酶是最常用的报 告基因，使用光度计和化学发光功能的微 孔板读板机我们可以很容易的检测到荧光 素酶，另一方面，由于在细胞实验中其背 景较低，因此具有很高的灵敏度。我们通 常用萤火虫荧光素酶表达水平高低反映出 我们感兴趣的基因在系统中的地位。而海 肾来源的荧光素酶则更常在多荧光实验中 作为第二种报告基因，来规范化多种在不 同样本中变化较大的指标如转染效率，细 胞活力等。 SpectraMax DuoLuc Reporter 试剂盒 可以对哺乳动物细胞中的萤火虫和海肾荧 光素酶进行高灵敏度的定量。依次向微板 孔中加入两种适量的反应试剂即可检测荧 光。这种双荧光信号检测系统可以在归一 化检测荧光信号(萤火虫荧光)的同时提供 持续表达的对照荧光信号(海肾荧光)。运 用SpectraMax iD5 多功能微孔板读板 机、注射器系统和 SmartInject 技术可 以将实验条件优化。在这里我们将展示如何在哺乳动物细胞模 型中，通过双荧光报告检测系统和 SpectraMax iD5 微孔板读板机来检测核转 录因子κB (NF- κB)的活性。NF- κB是参与 细胞进程中许多基因表达的“主要调节 者”，如炎症，免疫，分化，增殖和凋 亡。肿瘤坏死因子α (TNF- α)可以激活细胞 信号通路来降解NF- κB的抑制剂，从而促 使其释放并进入核内，调节数百目的基因 的表达。NF- κB通路的紊乱可以诱发多种 疾病，如多发性硬化病，糖尿病，阿尔兹 海默病等，因此利用合适的工具加深我们 对NF- κB通路的理解是十分必要的。
