生物发光细胞毒性检测能提供更高的检 测 限 、 速 度 和 准 确 性 , 已 有 文 献 证 实 (Crouch et al., 1993)。正常细胞在培养过 程中保持高水平的 ATP 浓度。在增殖过程 中,培养物中的 ATP 总量随细胞数量的增 加而增加。相反,死细胞由于合成妥协无 法维持高水平的 ATP,因此认为 ATP 水平 下降。在培养物中 ATP 水平反映了活细胞 数量,ATP 检测已被证实是最重要的预测 一般细胞毒性的方法之一。 另一种细胞毒性指标是细胞膜的损伤。它 允许试剂 ( 如碘化丙钠 ) 进入细胞,细胞成 分会分散到周围的介质中。细胞膜损伤时 会释放腺苷酸激酶 (AK),它是真核细胞中 普遍存在的一种蛋白 (Squirrell and Murphy, 1997)。 龙沙公司开发的 ViaLight Plus 和 ToxiLight 细胞毒性检测试剂盒利用了细胞的这些特 性,通过生物发光的方法检测这些变化。 这两种方法的灵敏度都低于 10 个细胞/孔。 ViaLight Plus 试剂盒能产生一种长时间的 荧光信号,其线性衰减率与细胞数无关。 ToxiLight 试剂盒是一种均相的、对细胞无 损的方法,可以直接测定孔中活细胞和死 细胞的混合总数。该试剂盒也可以用于从 实验板孔中取出的培养基样品,如果需要 还可以用另一种方法对剩余的培养基进行 检测。这对于珍贵样品和需要多种分析的 样品是非常好的选择。