近年来，将体外肿瘤细胞聚集物作为模拟体内组织环境模型的技术得到了重大的突破。该项技术能够使种植在低吸附圆底孔板中离散的细胞聚集成球体。而球体被认为能够比常规的二维(2D) 细胞培养更有效地模拟肿瘤行为。因为与肿瘤实体类似，3D 细胞球也包含暴露在球面的细胞和深埋在球内的细胞、都含有增殖和非增殖的细胞，并且球体中心是一个缺氧环境。越来越多的实例已成功地将这种三维球体模型用于各种用途的化合物筛选，以研究潜在的癌症疗法。然而要获得这类3D 球体分析的可靠方法时，是具有挑战性的：
• 定位聚焦在一个视野中即可看到完整的球体，以便对每个孔进行批量成像。
• 优化化合物和染色处理，确保染料渗透效果，避免干扰球体的位置。
• 在整个3D 结构中获取具有代表性的图像，最大限度地减少成像平面上下的失焦和背景信号。
• 快速分析图像以产生有意义的结果，从中可以得出实验结论。
