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美谷分子仪器(上海)有限公司
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公司/大学
Yashraj Biotechnology Limited

使用的产品
ImageXpress Nano 自动化成像系统 SpectraMax iD5 多功能微孔板读板机(酶标仪) MetaXpress 高内涵图像采集和分析软件
Yashraj Biotechnology 利用 ImageXpress Nano 来显著改进其多参数成像和分析

挑战

各个领域的意外毒性,如心脏毒性、肝脏毒性和神经毒性,是临床治疗的一种严重并发症,也是有希望的在研候选药失败的一个主要原因。动物研究广泛用于毒理学研究,以便对正在开发的各种治疗药物进行临床前安全性评估。药物穿透血脑屏障、药物代谢和相关毒性的物种差异,是导致动物模型到人体的药物试验失败的原因。当前的药物发现系统依赖于无限增殖化细胞系、人体疾病动物模型和人体临床试验。而且,在临床前阶段被认为安全的候选药,在临床阶段常常会发生毒性作用。平均只有约 16% 的药物获批用于人体。

在转为使用 ImageXpress Nano 前,Yashraj Biotechnology 曾使用一种相衬荧光显微镜,但后来发现这种显微镜无法获取细胞球/类器官模型的 Z 堆栈,且没有任何成像分析软件。

解决方案

Yashraj Biotechnology 正在开发干细胞领域最先进的研究,ImageXpress Nano 自动化成像系统让他们能够更好地对内部开发的 iPSC 源性肝细胞、心肌细胞和神经细胞进行成像,并进行各种不同类型的多参数检测。

结果

“从 3D 细胞团到全细胞和亚细胞细胞器,ImageXpress Nano 自动化成像系统都能够非常灵活地对各种样品进行成像。与常规荧光显微镜相反,[ImageXpress Nano] 能够在 3D 结构(细胞球/类器官)的不同平面上对焦。它还能够针对延时实验和活细胞成像功能预设的湿度、CO2 和温度控制,对各样品进行环境控制。MetaXpress 高内涵图像采集和分析软件可使用针对特定类型实验预先定义的方案进行成像和分析,同时可灵活设置自定义方案。总体而言,ImageXpress Nano 系统是一个非常适用于多参数和高通量成像和分析的平台。” - Yashraj Biotechnology 的首席科学官 Shweta Bhatt 博士

神经轴突生长检测

图:神经轴突生长检测: 未经处理和经紫杉醇处理、经 ß-微管蛋白(绿色)染色的 iPSC 源性前脑运动神经元的代表图像。前脑运动神经元用化合物处理三天,然后用抗 ß-微管蛋白 (TUJ-1) 固定和染色。

多能性 iPS 细胞表达多能性标记物,包括 Oct-4、Nanog 和 SSEA4

图: 多能性 iPS 细胞表达多能性标记物。(A) Oct-4,(B) Nanog,(C) SSEA4。经 DAPI(蓝色)复染的细胞核。

细胞骨架破坏 - 未处理和经拉春库林处理的、经肌动蛋白染色的 iPSC 源性肝细胞

图:细胞骨架破坏: 未经处理和经拉春库林处理、经肌动蛋白(绿色)染色的 iPSC 源性肝细胞的代表图像。肝细胞用化合物处理三天,然后用抗鬼笔环肽-肌动蛋白固定和染色。

使用原位末端标记法 (TUNEL) 和亚丙基 (PI) 检测 iPSC 源性心肌细胞

图:TUNEL 检测: 未经处理和经多柔比星处理、经 TUNEL(绿色)和亚丙基(红色)染色的 iPSC 源性心肌细胞的代表图像。心肌细胞用化合物处理三天,然后用 TUNEL 和 PI 进行固定和染色。

iPSC 源性神经前体细胞表达神经前体标记物 PAX6 和 Nestin

图: iPSC 源性神经前体细胞表达神经前体标记物 PAX6 和 Nestin。经 DAPI(蓝色)复染的细胞核。

细胞核经 DAPI 复染的 iPSC 源性 - Tuj1、GFAP 和 TH

图: A. iPSC 源性前脑运动神经元表达神经标记物 Tuj1。B. iPSC 源性星形胶质细胞表达神经标记物 GFAP。C. iPSC 源性中脑多巴胺能神经元表达神经标记物胸苷羟化酶 (TH)。经 DAPI(蓝色)复染的细胞核。