G-蛋白偶联受体（G protein-coupled receptor ，GPCR）是最重要的药物作用靶标，约50%的小分子药物靶向GPCR，适应症涵盖癌症、精神疾病、心血管疾病和代谢疾病等。

除了小分子药物，抗体药物也可以通过阻断或激活胞外信号对GPCR靶点的激活，调节胞内信号通路，从而发挥药效。目前已有针对CCR4的药物上市，还有多款与癌症、炎症、感染以及代谢相关的药物处于临床试验阶段。

对于新发现的GPCR靶标，如何开启药物开发的漫漫征途呢？下面我们将逐一介绍GPCR药物开发的几个“小伙伴”。

GPCR药物开发的第一步：构建高表达GPCR蛋白的细胞。

哺乳动物细胞内源表达水平较低，每个细胞一般不超过3000个拷贝。这个表达水平虽然足够维持适当的受体功能，但是对GPCR药物发现提出了挑战。大部分筛选方法需要在细胞膜上有更高的GPCR表达水平。在一些简单的细胞里构建表达体系的尝试遇到了不少的困难，或来自蛋白质折叠（大肠杆菌），或来自低表达（酵母），或是不正确的翻译后修饰（杆状病毒）。因此需要GPCR高表达的哺乳动物细胞用于药物发现。

ClonePix系统可以帮助从大量异质性的转染细胞中分离出稀有的高表达细胞。利用白光成像和荧光成像，ClonePix系统可以定量检测内源性的和细胞表面的GPCR，从而建立高表达特定GPCR的细胞株。

图1：ClonePix 2系统挑取高表达human G protein-coupled purinergic receptor P2Y1的CHO-K1细胞。A：挑取前成像；B挑取后成像；C：被挑取克隆的高分辨成像。

GPCR药物开发之小分子药物筛选

FLIPR高通量实时荧光检测分析系统具有实时加样，同步检测的特点，可以快速捕捉钙流的信号，结合精确的加样控制模块和灵敏的光学检测模块，是GPCR小分子药物高通量筛选的不二之选。

图2：FLIPR系统可用于快速高通量的钙流信号检测。

GPCR药物开发之抗体药物筛选

杂交瘤技术路线开发创新的抗体药物，需要筛选大量的杂交瘤细胞才能从中挑选出稀有的特异性的杂交瘤细胞。利用半固体培养基和荧光标记的抗原，ClonePix 2系统可以实现抗原特异性杂交瘤细胞的原位筛选和挑取，一步到位地挑选出目标杂交瘤细胞。此外，ClonePix 2系统还可以实现多色荧光筛选（同时表征抗体特异性以及抗体类型或产量）以及亚克隆（仅需1周左右的时间快速从杂交瘤细胞混合群体中分离出优质的杂交瘤细胞克隆）。

图3：ClonePix 2挑取抗原特异性杂交瘤细胞。白光成像（左）和荧光成像（右）。

稳定高表达的CHO细胞是抗体生产的基本要素。ClonePix 2可以在短时间内筛选大量的CHO细胞克隆，从中挑选出稳定高表达的CHO细胞。此外，CloneSelect Imager细胞生长分析系统可以进行全板全孔的快速成像，以图像为证据验证单克隆性。ClonePix 2和CloneSelect Imager两者配合完成稳定高表达细胞系的筛选。

图4：ClonePix 2通过白光（上左）、荧光成像（上右）和软件分析（下），从细胞群体中挑选出稀有的高表达细胞。

图5：CloneSelect Imager验证细胞系的单克隆性。

“小伙伴们”的联系方式

您一定想问，这么厉害的“小伙伴”，哪里去找呢？当然是联系Molecular Devices公司啦（好硬的广告，LOL……）。不过您也可以联系南京高新生物医药公共服务平台（以下简称BIP）寻求CRO服务。以下是这些“小伙伴”在BIP的近照

图6：BIP的ClonePix 2高通量细胞克隆筛选系统。

图7：BIP的CloneSelect Imager细胞生长分析系统。

图8：BIP的FLIPR高通量实时荧光检测分析系统。

更多BIP的信息：

南京高新生物医药公共服务平台有限公司（BIP）坐落于浦口高新技术产业开发区生物医药谷, 承载全方位的生物医药企业创业服务、集聚领军人才、汇聚行业资源。平台目前不仅配备了各类现代化高尖精密分析仪器，同时拥有医药研发领域从业多年的专业技术人员60余人，其中海归博士7人，硕士24人。目前平台构建了化合物活性筛选平台、先导化合物成药性评价平台、细胞生物学服务平台、高通量分析及分离纯化平台、药物质量研究技术平台、杂质分离纯化及结构鉴定技术平台等多项专业功能平台，致力于为各生物医药创新企业、医药生产企业及研究机构的研发提供准确、高效、客观的技术支持。