HTRF、 是 Cisbio 公司开发的用于检 测生物分子相互作用的实验技术 1。它将荧光共振能量转移 (FRET) 技术与时间分辨(TR) 荧光技术相结合,可以消除荧光寿命较短的背景荧光。该检 测方法 使 用铕 (Eu3+) 或 铽 (Lumi4 -Tb) 的穴状 化合 物作为供体,荧光团 ( XL665 或小分子 d2 ) 作为受体。当供体和受体距离足够近时,供体被一个能量源激发,可以引发能量转移到受体,使其在特定波长发出荧光。在 这 里, 我 们 展 示 了 如 何 使 用SpectraMax i3x 和SpectraMax iD5 多功能微孔板读板机应用 HTRF 技术进行Gq- 偶联受体的分析。G 蛋白偶联受体的分析主要通过检测cAMP 和 IP3 这两条信号转导通路调控介导的细胞内钙离子水平的升高。Cisbio 公司的 IP-One Gq 试剂盒通过检测 IP3 的稳定下游代谢产物——磷酸肌醇 (IP1) 的积累,为钙离子检测提供了一种替代方法